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黏孢子蟲屬通用PCR檢測試劑盒規(guī)格

產品簡介

黏孢子蟲屬通用PCR檢測試劑盒規(guī)格
上海聯祖生物相關產品:
ACP檢測試劑盒溶膠液/結合液調制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達到結合效果,大大提高回收效率

更新時間:2021-03-13
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產品名稱

 黏孢子蟲屬通用PCR檢測試劑盒規(guī)格

 英文名稱

 Myxosporidia spp.PCR

 貨號

 LZP7044

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
L-Ornithine HCL人上皮細胞*培養(yǎng)基大黃酚 分析標準品,≥98%

D-Ornithine HCL人成纖維細胞*培養(yǎng)基雙醋瑞因 ≥95%(HPLC)

DL-Ornithine HCL人前列腺上皮細胞*培養(yǎng)基黃豆苷原 98%

L-Ornithine Ethylester Dihydrochloride人胰島β細胞*培養(yǎng)基大黃素 分析標準品,≥96.0% (HPLC)

L-Aspartic acid人前列腺平滑肌細胞*培養(yǎng)基漆黃素 98%

L-Aspartic acid sodium sal人前列腺成纖維細胞*培養(yǎng)基甲溶液 ACS,37 wt. % in H2O, 含10-15% 甲穩(wěn)定劑

Potassium L-Aspartate人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養(yǎng)基京尼平甙  分析標準品,≥98%

L-Aspartic acid Mg salt人胰腺星狀細胞*培養(yǎng)基乙二溶液  40 wt. % in H2O (8.8 M)

D-Aspartic acid人胰腺上皮細胞*培養(yǎng)基甘草酸  93%

DL-Aspartic acid人淋巴內皮細胞*培養(yǎng)基加蘭他敏 98%

L-Asparagine人淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基二氫黃酮甙 97%

L-Asparagine Mohydrate人淋巴血管內皮細胞*培養(yǎng)基和厚樸酚 分析標準品

DL- Asparaning H2O人臍帶單核細胞*培養(yǎng)基和厚樸酚 ≥98% (HPLC)

L-Cysteine人外周血白細胞*培養(yǎng)基酚 97%

DL-Cysteine人呼吸道上皮細胞*培養(yǎng)基番茄紅素 分析標準品,≥95%

L-Cysteine.HCI.H2O人上皮細胞*培養(yǎng)基柚皮苷 95%

鹽酸平陽霉素p70 S6 Kinase/P70 Beta1  p70S6Kb抗原Thrombospondin 2  血小板反應蛋白2/凝血酶敏感蛋白2抗體

硫酸博萊霉素/博來霉素/爭光霉素PALB2(partner and locaizer of BRCA2)  乳腺癌易感基因相關蛋白2Thrombomodulin/CD141  血栓調節(jié)蛋白抗體

替佐米/保特佐米PAFR/PTAFR  血小板活化因子受體抗原thrombin II  凝血酶Ⅱ(凝血因子II)抗體

替佐米(標準品)Phospho-PAK4 (Ser99) peptide  磷酸化p21激活激酶4多肽抗原Thrap3/TRAP150  甲狀腺激素受體相關蛋白3抗體

博舒替尼PAK7/PAK5/MBT  激活激酶PAK7/PAK5抗原THRA1+2  甲狀腺激素受體α1+α2抗體

布地奈德PAR-1 (Protease-activated receptors-1)  蛋白酶激活受體-1抗原THRA1  甲狀腺激素受體α1抗體

布地奈德(標準品)PAR-2 (Protease-activated receptors-2)  蛋白酶激活受體-2抗原THOC2  轉錄因子THOC2抗體

亞葉酸鈣PAR4 (protease-activated receptor 4)  蛋白酶活化受體4/前列腺細胞凋亡反應蛋白4抗原Thioster-containing protein 1  按蚊硫酯包含蛋白-1抗體

亞葉酸鈣(標準品)PARP(poly ADP-ribose polymerase)N-Terminus  多腺苷二磷酸多聚酶抗原(N端)Thioredoxin 2  線粒體硫氧還蛋白2抗體

喜樹堿PAX8(Paired box gene 8)  配對盒基因8抗原Thioredoxin  硫氧還蛋白抗體
黏孢子蟲屬通用PCR檢測試劑盒規(guī)格人白細胞調節(jié)素(LR)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT5克

人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500克

人百日咳毒素(PT)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25000u

人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100毫克

人半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:20個/包

人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

人伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

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