組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?，分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿(mǎn)意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。檢測(cè)步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
(環(huán)己氨基 )-1-磺酸鈉(分子生物學(xué)級(jí))NRF2 (D1Z9C) XP®Rabbit mAb1,6-雙(二基膦基)己烷

血紅素(>95%,BR)Ubiquitin E3 Ligase Complex Antibody Sampler Kit六甲基二硅烷

聚二800Immunofluorescence Application Solutions Kit1--1-烷

炔雌;炔雌環(huán)戊Atlastin-1 (D2E6) Rabbit mAb茶螺烷

酸二酯酶 (比活度：>20 U/mg，BC)APBA2 (D8A6) Rabbit mAb溴甲基環(huán)己烷

化啶(>95% (HPLC),BC)IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)溴甲基環(huán)丁烷

十二烷基磺酸鈉(>95%,ch Grade)Galectin-3/LGALS3 Antibody2-(3,環(huán)氧環(huán)己基)基*氧基硅烷

硅酸鈉九水(>98%，BR)HMGN1 (D1I5O) Rabbit mAb2-溴甲基-1,二氧戊烷

多聚酸鈉(>98%，BR)NXF1 (D5X4G) Rabbit mAb(S)-叔丁氧羰基氨基吡咯烷

鹽酸三(>98%，BR)PathScan®Phospho-Ron (panTyr) Sandwich ELISA Kit(R)-叔丁氧羰基氨基吡咯烷

5-溴-吲哚基-β-D-吡喃半糖苷(>98%,BR)Aurora A/B Substra Antibody Sampler Kit二氮雜18-冠-6

酸氫二鈉二水Human IL-17A Neutralizing (D13C2) Rabbit mAb4,7,13,16,21-五氧雜-1,10-二氮雜二環(huán)[8.8.5]廿三烷

中性蛋白酶LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb三基硅烷

聚二200LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb六溴環(huán)十二烷

銻(> 98%,BR)Procaspase Antibody Sampler Kit溴三

結(jié)晶碳酸鈉(>99%,BR)MEIS1/2 AntibodyS-1-溴-2-甲基丁烷

中性氧化鋁(BR)Phospho-Gab1 (Tyr659) Antibody1-溴代金剛烷

D-(>99%，BC)PFKP (D2E5) Rabbit mAb2-硝基烷

山羊CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser104/106)  酸化雌激素受體α100 ul

山羊Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒ER-Alpha  雌激素受體α（用于wesrn blot）100 ul

ELISA試劑盒ER-Alpha  雌激素受體α100 ul

解脲脲原體(UU-Ab)ELISA試劑盒ER-alpha/beta  雌激素受體α/β100 ul

睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒ER-beta  雌激素受體β 100 ul

結(jié)核菌素(Tuberculin)ELISA試劑盒ER-Beta  雌激素受體β100 ul

結(jié)核菌桿IgM(TB-Ab IgM)ELISA試劑盒EpCAM/CD326  上皮特異性抗原100 ul

結(jié)核菌桿IgG(TB-Ab IgG)ELISA試劑盒ET-1  內(nèi)皮素-1100 ul

結(jié)核菌桿(TB)(IgA)ELISA試劑盒ET-1  內(nèi)皮素-11Kit
難辨梭狀芽胞桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框141抗體Pashane中文名：別名：2',6'-Dihydroxy-3',4'-dimethoxychalcone分子式：C17H16O5

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框144抗體Methyllucidone中文名：別名：分子式：C16H14O4

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框146抗體Lucidone中文名：別名：分子式：C15H12O4

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框150抗體Ethyllucidone中文名：別名：分子式：C17H16O4

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框156抗體Pistrobin chalcone中文名：球松素查爾酮?jiǎng)e名：2',6'-Dihydroxy-4'-methoxychalcone分子式：C16H14O4