試劑盒組成及試劑配制 ：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

服務(wù)：

公司產(chǎn)品僅用于科研我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。

樣品準(zhǔn)備：

1）血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3）細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5）保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

使用方法：

測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

12μg/ml    4號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

6μg/ml     3號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

3μg/ml     2號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5μg/ml   1號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

注意事項(xiàng):

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4． 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。

腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)試劑盒達(dá)卡巴乙二乙 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.8% (GC)水質(zhì)苯標(biāo)樣 濃度范圍:0.9,2.01(mg/L)，分析標(biāo)準(zhǔn)品

腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)試劑盒大車前苷硬酯乙酯 97%苯 MDI級,≥99.98%(GC)

腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)試劑盒大豆苷固藍(lán)RR鹽 AR苯乙烯 Standard for GC，>99.5%（GC)

腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)試劑盒大豆苷元葉 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%苯乙烯 CP,含10-15ppm 4-叔-丁鄰苯二酚穩(wěn)定劑

轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒大豆皂苷Aa固藍(lán)B 90%苯乙烯 99%,含10-15ppm 4-叔-丁鄰苯二酚穩(wěn)定劑

轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒大豆皂苷Ab高鐵試劑 98.5%苯乙烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品

轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)試劑盒大豆皂苷Ac固藍(lán)BB鹽 AR苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：二硫化碳

轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)試劑盒大豆皂苷Ba4-氟-3-硝三氟苯 99%苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液0.88mg/ml，溶劑:

質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)試劑盒 大豆皂苷Bb核黃素-5′-磷鈉鹽水合物 73-79%(HPLC)苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml

質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)試劑盒 大豆皂苷Bd戊菊酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，100%叔丁 色譜級,≥99.9% (GC)

干因子受體(SCFR)試劑盒大豆皂苷Be脒鹽鹽 96%乙苯 >99.5%(GC)

干因子受體(SCFR)試劑盒大豆皂苷Be酯(+)-葑 standard for GC, ≥99.5% (GC)2-丁 ACS, ≥99.0%

干因子/肥大生長因子(SCF/MGF)試劑盒大果桉B for LC-MS, ~98% (T)1,2,4-三苯 98%

干因子/肥大生長因子(SCF/MGF)試劑盒大花羊藿苷F固黑K鹽 80%2,5-二 99%

可溶性CD40配體(sCD40L)試劑盒 大黃酚固紅 3 GL Biological stain降烯二酐 99%

可溶性CD40配體(sCD40L)試劑盒 大黃酚-8-O-葡萄糖苷固紅RC 生化試劑級降烯二酐 95%
Cath G Ab組織蛋白酶G自身抗體ELISA試劑盒產(chǎn)品背景：

細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一，它在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定和一些疾病發(fā)生過程等方面起著十分重要的作用。

在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨suan(PS)只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細(xì)胞凋亡早期，細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨suan(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。在體內(nèi)，巨噬細(xì)胞可以識別翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜表面的PS 從而將這些程序性死亡的細(xì)胞清除，因此凋亡過程中并不伴隨局部的炎癥反應(yīng)，而在細(xì)胞壞死的過程中則常常伴隨著炎癥反應(yīng)。

AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細(xì)胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的PS 高親和力特異性結(jié)合。PS 外翻發(fā)生在細(xì)胞核破裂，DNA 片段化以及凋亡相關(guān)蛋白出現(xiàn)之前，這使得Annexin V 與PS的結(jié)合成為凋亡早期的一種重要檢測標(biāo)志事件。

檢測原理：

在正常的活細(xì)胞中，磷脂酰絲氨suan(phosphotidylserine，PS)位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)，但在早期凋亡的細(xì)胞中，PS 從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面，暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。

Annexin-Ⅴ能與PS 高親和力結(jié)合?？赏ㄟ^細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨suan與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。用標(biāo)記了APC的AnnexinⅤ作為熒光探針，利用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。細(xì)胞壞死的過程中也會發(fā)生細(xì)胞膜損傷，壞死的細(xì)胞會結(jié)合Annexin V-APC。

Annexin V-APC 通常與細(xì)胞膜非滲透性核酸熒光染料聯(lián)合使用以檢測凋亡細(xì)胞。常用的染料是PI。正常細(xì)胞和早期凋亡細(xì)胞的細(xì)胞膜是完整的，核酸染料PI 不能透過完整的細(xì)胞膜，但在凋亡中晚期的細(xì)胞和壞死細(xì)胞，PI 能夠透過細(xì)胞膜與細(xì)胞核結(jié)合呈現(xiàn)紅色。

PI/Annexin V-APC試劑盒將Annexin Ⅴ與PI匹配使用，可以將凋亡早期的細(xì)胞和晚期的細(xì)胞以及死細(xì)胞區(qū)分開來。壞死細(xì)胞可以同時與Annexin V-APC和PI 結(jié)合顯色，而PI 則被排除在活細(xì)胞(APC陰性)和早期凋亡細(xì)胞(APC陽性)之外。

Annexin V-APC 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒可以方便快捷的檢測凋亡細(xì)胞，使用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設(shè)備進(jìn)行檢測。

儲存條件：染色液2-8℃避光保存；結(jié)合液2-8℃保存；